凭据USP药典律例要求，HCP的检测回收率要求在 70-130% （在定量限左近的回收率可接受领域 50-150%）。
对于贸易化试剂盒企业通常必要验证试剂盒的系统合用性和对自己样本的合用性。
建议优先通过分歧试剂盒或经验证的前处置对样本残留在LLOQ以上进行正确汇报，其次能够思考，在最幼稀释倍数（MRD）前提下，将检测了局汇报为：<定量下限*（MRD）稀释倍数。
任何一个汇报值都必须成立在正确度合格的前提下，若是样本稀释线性、加标回收率不合格，那么可能存在样本基质滋扰，因而所谓低于LLOQ的汇报就不够正确，无法单一地据此进行残留水平汇报。
目前重要可参考的凭据是USP<1132> Residual Host Cell Protein Measurement in Biopharmaceuticals中，3.2.3 GENERATION AND QUALIFICATION OF REPLACEMENT REAGENTS，一节描述抗原抗体若是产生调换，建议对新旧抗原，抗体进行头仇家比力，确认校准品蛋白含量，抗体检测机能，覆盖率进行比力，除此之表，建议对现有产品的工艺高低游节点，从收成到原液DS，进行检测比力，确认新试剂盒能检出类似，或更高的杂质去除率 ；此表，3.3 Immunoassay Method Development and Qualifying as Fit for Use，描述了平台型步骤合用考量建议。1. 模仿幼量空细胞发酵获得宿主蛋白，如：CCF，检测在类似浓度前提下，与平台步骤中校准曲线的类似性 ；2. 利用2D等步骤比力CCF与试剂盒中校准品的类似度 ；3. 比力现实工艺收成液，原步骤和平台型步骤检测汇报水平。通常以为，汇报值差距在2倍以内，可评价为类似，可代替 ；4. 有前提情况下，利用类似总蛋白定量步骤，以及药物蛋白含量可定量前提下，对现实工艺中，收成CCF的HCP进行扣减推算，评价试剂盒检出汇报与扣减了局在2倍以内，也能够以为类似，可代替 ；但是现实情况中，往往头仇家比力抗体，抗原难以实现（自行定造化开发的可行），所以或许现实能参考的就是1. 比力工艺高低游，检测杂质去除率，类似或更高-可代替 ；2. 比力现实收成液，检测汇报水平类似水平，2倍以内-能够代替 ；
CHO HCP检测试剂盒三步法没有要求，但是一步法操作建议先加样本再加检测抗体，反过来容易导致本底OD值偏高，影响线性拟合及浓度回算
靠近下限的样本浓度检测误差更大，通常CV%能够达到25%，数据中根基上满足2倍左右的差距，在操作上更精密一些
1.裂解液分歧：质粒出产常用NaOH-SDS ；沉组蛋白选取尿素或者是超声等全裂解大局 ；2.裂解主张分歧：质粒出产中裂解液是为了中和及沉淀蛋白质 ；沉组蛋白工艺为了充分溶化宽恕体等蛋白组分 ；3.收成液组分分歧：质粒样本以及残留的耐碱HCPs ；沉组蛋白工艺中蕴含主张蛋白、HCPs、杂质等 ；
1.正确性高：DNA校准品有齐全的溯源链，溯源到国度尺度品，且校准品为即用型状态，简化操作步骤的同时削减由于稀释误差导致的标曲异常 2.专属性好：特异性检测相应宿主细胞的残留DNA，不受其他表源细胞滋扰。 3.精密度高：批内沉复性高，批间差距幼。 4.防滋扰：UNG防传染系统，有效去除PCR产品残留传染 ；增长内部节造（IC），提高对样本滋扰、反映配造的检测节造。
在初次使用时建议您进行系统合用性和样本合用性的钻研。系统合用性重要蕴含线性领域、空缺限、定量限和沉复性的验证 ；样本合用性必要验证空缺基质滋扰、样本稀释线性、样本/空缺加标回收率、沉复性和选择性。通过以上钻研以确认用户端平台、仪器、操作等是否与试剂盒相匹配，以及待检测样本是否存在滋扰，使检测汇报值越发正确。
