1）造就基保留 ，尽量削减造就基与空气接触 ，若开瓶后的造就基短功夫内不能能用完 ，能够按试验铺排进行分装 2）细胞必要提前一天以稀释的方式接种 ，造就24h后进行转染 3）转染前不成对细胞进行离心换液 ，也尽量预防新鲜造就基的参与
-40°保留最好 ，-20°也能够。
冻存液产品推荐用广东会官网品牌的UC04无血清细胞冻存液 ，若客户自己配冻存液 ，推荐用10%的DMSO和20%的血清 ，若是不加血清会较大影响细胞冻存成效 ，冻存密度可节造在1E7 cells/管。
肇始接种密度推荐0.6E6 cells/mL ，造就三天后密度可达4E6-5E6 cells/mL ，必要进行传代操作；若肇始密度为1E6 cells/mL ，则两天可达到4E6-5E6 cells/mL。
正常造就中（或稳转293细胞系的补料批造就） ，造就D3/D5/D7别离增长造就体积5%比例HA01补料 ，也就是隔天加。若是利用于瞬转蛋白的表白 ，必要转染后16-24h后增长补料。补料成分重要就是一些氨基酸、葡萄糖和微量元素。
031c重要是合用于293稳转细胞株的系统 ，增长规划是5% ，持续补料 ，不容易出现渗入压过高的情况。041c重要是合用于瞬转的系统 ，用于扩增病毒或者蛋白 ，转染后24h补料一次 ，补料比例为工作体积的5% ，在后续造就过程中必要维持残糖浓度在20 mM左右。
稳转造就由于一向加补料 ，必要沉点关注渗入压的情况 ，以及里面的糖分必要监测 ，通常节造在6g/L。谷氨酰胺必要每周测一次。
血糖仪的误差比力大 ，研发人员之前用尺度液测过一次 ，比现实的值低三分之一 ？突芄灰幌蛴醚且墙屑嗖 ，凭据初始的糖量 ，后续补糖节造在初始的量的领域亦可（好比一路头血糖仪测的是4g/L ，那么后续就节造在用血糖仪测的都是4g/L即可）。
凭据分歧蛋白的具体情况来看 ，可能隔天收 ，可能最终收。要看蛋白是不是容易降解的蛋白 ，若是是容易降解的蛋白就必要实时收取。若是像IgG这种不容易降解的蛋白 ，通常就是最后收。要把稳蛋白产量高上去之后天生和降解的动态平衡。
293细胞做瞬转蛋白表白 ，5-7天后通常能够得到100mg-1000mg/L。CHO细胞持久用于稳转蛋白表白 ，有的能够做到10g/L ，开发的工艺和有关的造就基开发都比力成熟 ，所以表白量都要比293高。
