欧洲药典草案对快检步骤的参考尺度提出了具体的要求,其主题在于确保检测数据的底子靠得住性:
参考物质的选择:可为菌株或核酸,但如单独使用支原体DNA作为尺度,需充分证明;
菌株质量的指标:菌株应在指数成持久收成,以保障其高活性;基因组拷贝数(GC)的测定必须思考整个菌液;
最关键的是,明确要求基因组拷贝数与菌落形成单元的比值(GC/CFU)应幼于10。这一比值成为衡量菌株质量、预防核酸荟萃导致检测误差的主题科学参数。
中国药典2025版在第0234章节“生物制品出产用动物细胞基质造备及质量节造”中,对支原体检测覆盖的具体种类提出了新的要求:“如为虫豸细胞,或细胞造就过程中使用了植物源性资料,应进行螺原体查抄,所用步骤如造就法或核酸法应能检测中央原体属和虫原体属。”
该更新明确指向两种特定情况:
(a) 出产为虫豸细胞(如Sf9、Sf21等细胞系宽泛利用于杆状病毒表白系统);
(b) 出产过程中使用了植物源性资料(如植物源性的水解物、成长因子等造就基增长成分)。
对于上述情况查抄菌株的领域从“支原体”扩大到“螺原体”,并明确要求能覆盖中央原体属和虫原体属。